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腸微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明

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                            腸微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明

你悄悄地走來(lái),,走上山坡,。帶去了一件黃衣裳,,一件紅衣裳,。瞧這邊的山像是鍍上了一層黃金。瞧那邊的山上,,霜葉如醉,,簡(jiǎn)直是一片紅海,遮蓋了半個(gè)天際,,和霜光連在一起,,紅得像火焰  在燃燒。這一黃一紅連成一片,,給人一種說(shuō)不出的溫暖,。接下來(lái)介紹   腸微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基操作說(shuō)明.

優(yōu)點(diǎn):

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

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