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（αHBDH）ELISA檢測試劑盒操作注意事項

  試劑盒保存在2-8℃,，使用前室溫平衡20分鐘,。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用,。

  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存,。

  預處理后的樣本無需稀釋,，直接取10μL加樣即可。

  嚴格按照說明書中標明的時間,、加液量及順序進行溫育操作,。

  所有液體組分使用前充分搖勻。
檢測原理試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被小鼠α羥基丁酸脫氫酶（αHBDH）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠α羥基丁酸脫氫酶（αHBDH）呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度。

樣品收集,、處理及保存方法1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后,，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清,。

3.  細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清,。

5.  保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝,，凍存于-20℃,，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

（αHBDH）ELISA檢測試劑盒自備物品

酶標儀（450nm）

高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL,、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒溫箱