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標(biāo)泛素羧基末端水解酶11ELISA試劑盒檢測(cè)程序：

 在使用前,，將所有試劑和樣品室溫,。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議,，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測(cè)定1,。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中,。

2,。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑,，密封保鮮袋,，將未使用的井在4°C的含量布局表。
3.每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品,。封面用膠粘帶提供,。孵育2小時(shí)，在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣4,。每孔中取出的液體,，不洗。

5,。向每孔中加入100μl生物素抗體（1倍）。蓋上一個(gè)新的膠粘帶,。孵育1小時(shí),，在37℃下（生物素抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,，輕輕混勻,，直到出現(xiàn)均勻解決方案。）

6,。吸液的各孔和洗滌,，共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶,，多道移液器，歧管器,，或autowasher,，和,，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能,。后一次洗滌后,，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干7,。向每孔中加入100μl的HRP-抗生物素蛋白（1×）,。量的微量滴定板，用一個(gè)新的粘接劑條,。溫育1小時(shí),，在37℃下

8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,，在步驟6的5倍,。

9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中,。孵育15-30分鐘,，在37℃下避光

10。一站式解決方案,，每孔加入底物,，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合,。

11,。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm,，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度,。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處,。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù),。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,，可能會(huì)比較高,，不太準(zhǔn)確。
標(biāo)泛素羧基末端水解酶11ELISA試劑盒原理：

此法采用定量夾心酶聯(lián)免疫技術(shù),?？贵w具體為USP11已經(jīng)被預(yù)先涂到微孔板。標(biāo)準(zhǔn)和樣品吸入井和USP11目前的固定抗體的約束,。生物素共軛的抗體特異性USP11除去任何未結(jié)合的物質(zhì)后,，加入到孔中?？股锼氐鞍坠曹椀睦备^氧化物酶（HRP）的洗滌后,，加入到孔中,。經(jīng)過洗滌，以除去任何未結(jié)合的抗生物素蛋白的酶試劑,，底物溶液加入到孔中,，并顏色發(fā)展成比例的量的初始步驟中USP11綁定。彩色顯影被停止并測(cè)量的顏色的強(qiáng)度,。