資料下載
豬載脂蛋白A1apo-A1酶聯(lián)免疫試劑盒的酶標比色儀的使用
閱讀:138 發(fā)布時間:2018-12-4
豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒實驗過程中酶標比色儀的使用
酶標比色儀簡稱酶標儀,,通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計,。針對固相載體形式的不同,,各有特制的適用于板,、珠和小試管的設(shè)計,。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標儀,。酶標儀的主要性能指標有:測讀速度、讀數(shù)的準確性,、重復(fù)性,、度和可測范圍、線性等等,。優(yōu)良的酶標儀的讀數(shù)一般可到0.001,,準確性為±1%,,重復(fù)性達0.5%。舉例說,,若某孔測得的A值為1.083,,則該孔相對于空氣的真實A值應(yīng)為1.083±0.01(1.073~1.093),重復(fù)測定數(shù)次,,其A值均應(yīng)1.083±0.05(1.078~1.088)在之間,。酶標儀的可測范圍視各酶標儀的性能而不同。普通的酶標儀在0.000~2.000,,新型號的酶標儀上限拓寬達2.900,,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示,。應(yīng)注意可測范圍與線性范圍的不同,,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標儀的可測范圍為0.000~2.900,,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標準曲線時應(yīng)予注意,。
酶標儀不應(yīng)安置在陽光或強光照射下,,操作時室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,,測讀結(jié)果更穩(wěn)定,。
測讀A值時,要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,,如OPD用492nm波長,。有的酶標儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,,次在適波長(W1),,第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動ELISA板的位置,。例如OPD用492nm為W1,,630nm為W2,終測得的A值為兩者之差(W1-W2),。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。