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ELISA試劑盒加液過(guò)程中需要注意什么,?
閱讀:118 發(fā)布時(shí)間:2018-8-22提 供 商 | 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 67.5KB |
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ELISA試劑盒加液過(guò)程中需要注意什么?
ELISA試劑盒在科研領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,,靈敏度高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)更是*,。那我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中,如遇到試劑盒需要加液,,那加液的過(guò)程中是不是也有我們應(yīng)該注意的地方呢,?今天勁馬小編就給大家?guī)?lái)有關(guān)“ELISA試劑盒加液過(guò)程中需要注意什么”的解答,下面請(qǐng)看具體講解,。
在ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,,加底物,。
加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,,并注意不可濺出,,不可產(chǎn)生氣泡。
加標(biāo)本一般用微量加樣器,,按規(guī)定的量加入板孔中,。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣,。有此測(cè)定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,,再在其中加入血清標(biāo)本,,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時(shí)可用定量多道加液器,,使加液過(guò)程迅速完成
作為ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液,、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份,。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),,有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物),。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,,其他成份均同等于血清,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固后即可取得,。除特殊情況外,,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
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