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多克隆抗體和單克隆抗體的作用用途
閱讀:155 發(fā)布時間:2024-6-24單克隆抗體的定義:
單克隆抗體是僅與目標蛋白某一特定表位結(jié)合的單一抗體,。
單克隆抗體的制備:
簡單來說就是將免疫原注射到宿主動物體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng),,之后把 B 細胞從脾臟中移出,,單種 B 細胞與骨髓瘤細胞融合為 B 細胞雜交瘤,,成為一個永生化胞株,。這樣一來,,雜交瘤的 B 細胞就會一直產(chǎn)出只識別單一表位的單克隆抗體,通常這個胞株會有一個特定的克隆號(clone number),,用來與其他胞株區(qū)分,。雜交瘤接下來可以被注射到小鼠的腹腔中大量,雜交瘤分泌富含抗體的一種液體,,被稱作腹水,,用注射器抽取純化,就可獲得大量的單克隆抗體,。
多克隆抗體定義:
多克隆抗體是指與目標蛋白上多種不同表位結(jié)合的多種不同抗體.
多克隆抗體制備:
多克隆抗體的第一步和單克隆抗體一樣,,都是將免疫原注射到宿主體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng),激活了多種B細胞,。不同的是免疫過后,,多克隆抗體就直接從免疫宿主的血清中分離出來,或接著進行純化,,沒有與骨髓瘤細胞融合的過程,。一旦宿主動物死亡,需要免疫新的動物,,這時血清中的抗體就會有所不同,。雖然多抗每批次有輕微差別,,但是因為它識別的表位多,這個差別影響并不算太大,,而單克隆抗體雖然價格偏高,,可是特異性更強更穩(wěn)定??梢哉f單抗和多抗是各有各的優(yōu)點,。
多克隆抗體和單克隆抗體的作用用途:
1、定義多克隆抗體和單克隆抗體有用性的兩個關(guān)鍵特征涉及它們各自對抗原的特異性和靈敏度,。
2,、抗體的特異性是由其結(jié)合域和目標抗原之間的相對親和力決定的,而其他分子是存在的,。對這種特異性的利用對免疫學研究人員和臨床醫(yī)生來說是至關(guān)重要的,因為許多應(yīng)用都是利用多克隆和/或單克隆抗體來專門檢測目標分子,。結(jié)合抗原特異性,,抗體的靈敏度是一個重要的參數(shù),決定了它在實驗室的實用性,。
3,、高靈敏度的抗體非常適用于診斷應(yīng)用,如免疫沉淀,、West Blot 和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),,因為它們能夠識別低水平的目標抗原。
免疫沉淀是一種分析技術(shù),,通過使用特異性結(jié)合抗原的抗體將抗原從混合物中分離出來,。然后用固定化抗體或磁珠對產(chǎn)生的抗原-抗體復合物進行進一步處理,從而使抗原-抗體復合物在分析前從混合物中分離出來,。
4,、與免疫沉淀法一樣,ELISA 可以使用多克隆或單克隆抗體來檢測溶液中的目標抗原,。
5,、間接和夾心 ELISA 是兩種免疫測定形式,在整個過程中使用兩種類型的抗體:單克隆抗體由于對目標抗原的高特異性,,通常首先應(yīng)用(一級),;多克隆抗體由于能夠以高靈敏度放大低信號,因此作為二級試劑更有用,。
6,、除了 ELISA,抗體對于免疫組化和流式細胞儀等檢測技術(shù)也很有用,,因為它們可以以高分辨率檢測復雜組織或細胞內(nèi)的抗體-抗原構(gòu)建,。
企業(yè)對抗體特異性和靈敏度的確認使得像 ELISAs 這樣的免疫測定可以根據(jù)抗原和抗體的使用方式而采取不同的形式,這使得這些測試具有高度的通用性。例如,,一種免疫測定需要高度敏感的測試來檢測一種未知的病原體,,由于多克隆抗體能夠識別一種抗原上的多個表位,因此會從多克隆抗體中獲益,。如果一個病原體或抗原先前已經(jīng)被定性,,那么在下游應(yīng)用中使用單克隆抗體來進一步定性可能更合適。
7,、在實驗室外,,抗體可以被用來增強、模仿或恢復免疫系統(tǒng)攻擊疾病目標的能力,。除了一些例外,,單克隆抗體比多克隆抗體更適合于治療目的,因為它們具有同質(zhì)性,,對單一表位的高特異性和低程度的交叉反應(yīng),。
8、這些特性對于有效的癌癥治療特別重要,,因為腫瘤細胞能夠逃避或阻斷免疫系統(tǒng),。單克隆抗體療法對癌細胞發(fā)揮作用的一些方式包括涉及直接結(jié)合以誘導細胞死亡的機制和阻斷腫瘤生長因子和血液供應(yīng)的間接機制。