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從不同方面比較原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)
閱讀:164 發(fā)布時間:2024-5-13原代細(xì)胞生長緩慢,,一般認(rèn)為,,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,,細(xì)胞的生長會出現(xiàn)停滯,,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機",,這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,,從而可能無限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系,。
一,、定義方面:
1、原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的第1次培養(yǎng),,也叫初代培養(yǎng),。
2、傳代培養(yǎng)是指需要將培養(yǎng)物分割成小的部分,,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),,再進(jìn)行培養(yǎng)的過程。對單層培養(yǎng)而言,,80%匯合或剛匯合的細(xì)胞是較理想的傳代階段,。
二、特點方面:
1,、原代細(xì)胞培養(yǎng)與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動上相似性大,。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài),。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長,、代謝、繁殖提供有力的手段,。同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件,。
2、當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后,,隨著培養(yǎng)時間的延長和細(xì)胞不斷分裂,,一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止,;另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒,。
三、生存率方面:
1,、原代細(xì)胞培養(yǎng)過程相對復(fù)雜,,培養(yǎng)條件要求也更高,。
2、傳代細(xì)胞培養(yǎng)一般普通培養(yǎng)條件下都容易生存,,傳代細(xì)胞容易增殖,。
四、原理方面
原代細(xì)胞培養(yǎng):將動物機體的各種組織從機體中取出,,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶),、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細(xì)胞,,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存,、生長和繁殖,,這一過程稱原代培養(yǎng)。
傳代細(xì)胞培養(yǎng):當(dāng)細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,,細(xì)胞才能繼續(xù)生長,。這一過程就叫傳代。傳代培養(yǎng)可獲得大量細(xì)胞供實驗所需,。傳代要在嚴(yán)格的無菌條件下進(jìn)行,,每一步都需要認(rèn)真仔細(xì)的無菌操作。