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微生物培養(yǎng)基的操作步驟與注意事項
閱讀:436 發(fā)布時間:2023-11-6培養(yǎng)基( culture medium)是人工配制的,,適合微生物生長,、分離鑒別的營養(yǎng)基礎(chǔ),。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨,、牛肉浸粉、酵母浸粉,、氯化鈉,、瓊脂等基本營養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣,。例如,,無菌試驗培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細(xì)菌,,它直接關(guān)系到人民用藥安全,;在臨床及食品衛(wèi)生檢驗中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基,,此類培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同,,需要加入抑菌劑、指示劑,、血液,、糖等試劑,以利于特定細(xì)菌的分離與鑒別,,需要使細(xì)菌大量生長,、繁殖的各類培養(yǎng)基;病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細(xì)胞培養(yǎng)液,主要成分為多種氨基酸,、核苷酸,、無機鹽、生長因子等,。
微生物培養(yǎng)基操作步驟:
1,、準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈,。
2、校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),,標(biāo)記劃線,,加熱溶解,補充水分,,測定酸堿度,,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi),。
3,、過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明,。
4、分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,,準(zhǔn)備滅菌。
5,、滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,,但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性,,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,,即壓力越大,,蒸汽溫度就越高。因此,,在同一溫度條件下,,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,,菌體吸收水分后,,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,,殺菌效果好,。
微生物培養(yǎng)基注意事項:
1、根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基,。
2,、注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比,保持合適滲透壓,。
3,、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi),以利于不同類型微生物的生長繁殖或代謝產(chǎn)物的積累,。
4,、要注意各種原料的配比,每種培養(yǎng)基的配比合適的配比,,可以按照老師的要求去做,。
5、如需要加熱的時候注意時間的把握,。