日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

PCR引物設(shè)計(jì)需要注意：

1,、引物長(zhǎng)度：一般為15～30個(gè)堿基,，引物太短會(huì)降低擴(kuò)增特異性,。引物過(guò)長(zhǎng)退火溫度會(huì)提高,，不利于反應(yīng)的發(fā)生。

2,、引物序列：設(shè)計(jì)引物時(shí)堿基要隨機(jī)分布,，避免堿基或核苷酸的重復(fù)導(dǎo)致錯(cuò)誤引發(fā)；引物間和引物自身序列也要盡量避免互補(bǔ),，防止形成引物二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu),。

3、堿基分布：GC含量一般40-60%,，含量過(guò)高或過(guò)低都不利于進(jìn)行反應(yīng),。其含量過(guò)低會(huì)使引物不穩(wěn)定；過(guò)高會(huì)引發(fā)非特異性擴(kuò)增,。

4,、 Tm值：引物的Tm值（解鏈溫度）=4（G+C）+2（A+T）,，盡可能保證上下游引物的Tm值一致，一般不超過(guò)2℃,。

5,、 引物設(shè)計(jì)好后進(jìn)行BLAST檢查，檢測(cè)是否與基因組中重復(fù)序列或其它基因位點(diǎn)有交叉同源,；

6,、 引物的特異性：引物的3'端如果含有一個(gè)G或C殘基能增加引物的特異性。