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抗體的分裝與保存闡述
閱讀：273 發(fā)布時間：2023-5-4 機體在抗原物質(zhì)刺激下,，由B細胞分化成的漿細胞所產(chǎn)生的,、可與相應抗原抗體抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應的免疫球蛋白,。免疫球蛋白是結(jié)構(gòu)及化學的概念,，而抗體是生物學及功能的概念,。可以說,，所有抗體都是免疫球蛋白,，但并非所有免疫球蛋白都是抗體?？贵w保存得當與否,，直接決定了抗體的活性和使用效果。如果抗體保存得當,，大部分抗體活性都可以維持數(shù)月甚至數(shù)年,。
1. 收到抗體后請在12000rpm 離心1-5min， 將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來后再打開管蓋進行分裝和保存,！
2.對絕大多數(shù)抗體來說,，保存在-20 ℃是wan全足夠的,。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80℃ 會有更多的好處！
3. 分裝的量以一次實驗用完為好,，最少不要少于10ul 每份,。因為分裝體積越小，抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響,。分裝可以zui 大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,，同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。復融后的分裝抗體如果一次用不完,，將剩余母液保存在4 度,，避免再凍起來！
4. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對抗體活性是沒有影響的,，因蛋白在高濃度時更不容易降解,。所以如果抗體很快(1-2 周)會使用，推薦在4 ℃保存,，這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害,。如果要長期保存則最好是在-20 ℃ 或-80 ℃。而對于抗體工作液來說最好當天配制當天用完,。
5.為了避免反復凍融,，很多抗體公司會加50%的甘油到抗體中來避免反復凍融，甘油在-20 度 會降低冰點,，這對很多抗體可能是可行的,。但加入甘油的溶液不建議在-80 度保存，因為這已經(jīng)超過了甘油的冰點,。
6.因蛋白在高濃度時更不容易降解,，因此部分抗體公司通過在抗體中加入BSA 等蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑來提高蛋白質(zhì)濃度以達到保護抗體的目的。但是如果抗體要用來標記的話,，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑,，因為這些穩(wěn)定劑會和抗體一起競爭結(jié)合標記物。
7.為了防止微生物污染,，抗體溶液中一般會加入終濃度0.02% (w/v)的疊氮化na ,。但在一些特殊情況下，如抗體用于處理活細胞和體內(nèi)研究,，以及要偶聯(lián)帶有氨基基團的抗體時,，需要除去疊氮化na。通常的去除方法有凝膠電泳和超濾法,。
特殊抗體的保存條件：
1. 酶聯(lián)抗體：保存在4 ℃,，避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存,。尤其是熒光抗體,，對光極為敏感,，因此在所有的實驗階段也是要避光操作的。偶聯(lián)后的抗體可以加入疊氮化na保存,，但是濃度只能是0.01％,。對于需要偶聯(lián)的抗體，thimerosal(merthiolate)可以替代疊氮化na作為保護劑,。
3. IgG3 的同型對照：永遠保存在4 度,，避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程,，該抗體非常容易形成多聚體