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ELISA試劑盒單克隆抗體制備時(shí)很多朋友會(huì)遇到這樣的問題，即咱們免疫用的蛋白為原核表達(dá)蛋白而意圖蛋白是真核蛋白或病毒等,，由于沒有規(guī)范品咱們做出來的抗體沒有辦法用規(guī)范品來驗(yàn)證是否與其發(fā)作反響,，終究導(dǎo)致咱們做出的是無用抗體,。以下內(nèi)容為試驗(yàn)室技能總結(jié)的幾種方法，期望對(duì)大家有所協(xié)助,。

一、若要檢測(cè)的抗原為某種新的病毒

ELISA試劑盒辦法：

1,、很多做出該病毒某個(gè)蛋白的單克隆抗體,；

2、很多收集該病毒疑似感染動(dòng)物或人血液,，用PCR的辦法進(jìn)一步斷定每份血液是否真的有該病毒存在,；

3、將你做出的很多抗體中的一個(gè)做符號(hào)作為符號(hào)抗體,，其他一切抗體作為包被抗體,，檢測(cè)第二步中斷定陽性的血清，成果與陰性血清做比照,，并畫出點(diǎn)狀分布圖,。若陽性血清大部分的點(diǎn)在陰性血清之上祝賀你找到配對(duì)抗體了；若成果相差不大,，請(qǐng)從頭符號(hào)一株抗體做相同試驗(yàn),。

二、若要檢測(cè)抗原為某一細(xì)胞因子ELISA試劑盒辦法：

1,、通過超表達(dá)的辦法樹立安穩(wěn)表達(dá)的細(xì)胞系，留意要在意圖蛋白上加相應(yīng)的標(biāo)簽,，以便純化,。若僅僅是找到配對(duì)抗體則不需求純化甚至不需求樹立安穩(wěn)表達(dá)的細(xì)胞系瞬時(shí)轉(zhuǎn)染就可完成，若要進(jìn)一步作出規(guī)范曲線請(qǐng)純化,。

2、 將細(xì)胞系樹立后,，咱們就可以拿到規(guī)范品了，做配對(duì)作業(yè)就相應(yīng)簡(jiǎn)略,。

3、若該種細(xì)胞因子可有某種陽性影響物很多影響而來,，也可不做細(xì)胞系,。用陽性影響物影響，咱們細(xì)胞影響物的上清液來做規(guī)范品也可,。