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PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,，低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右),，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈,。基于聚合酶的PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備,，能在變性溫度,，復(fù)性溫度,，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。PCR反應(yīng)特點(diǎn)有下列四個(gè)：

1,、特異性強(qiáng)

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,；

②堿基配對(duì)原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性,；

④靶基因的特異性與保守性,。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合（復(fù)性）可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加,，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高,。

2,、靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12）量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克（μg=10-6）水平,。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞,；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU（空斑形成單位）,；在細(xì)菌學(xué)中最小檢出率為3個(gè)細(xì)菌,。

3、簡(jiǎn)便,、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng),。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素,，無(wú)放射性污染,、易推廣。

4,、對(duì)標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,，DNA 粗制品及RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液,、體腔液、洗嗽液、毛發(fā),、細(xì)胞,、活組織等DNA擴(kuò)增檢測(cè)。