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細(xì)菌數(shù)量的測定的幾種方法
閱讀：997 發(fā)布時間：2022-5-311,、顏色改變單位法（colour change unit,簡稱CCU）
這種方法通常用于很小,，用一般的比濁法無法計數(shù)的微生物，比如支原體等,，因為支原體的液體培養(yǎng)物是完-全透明的,，呈現(xiàn)為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計數(shù),，由于支原體固體培養(yǎng)很困難,，用cfu法也不容易計數(shù)，因此需要用特殊的計數(shù)方法,，即CCU法,。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標(biāo)，來計數(shù)微生物的相對含量的,，下面以解脲脲原體為例,，簡單介紹其操作：
（1）取12只無菌試管，每一管裝1.8ml解脲脲原體培養(yǎng)基,。
（2）在第1管加入0.2ml待測解脲脲原體菌液,，充分混勻，從中吸取0.2ml加入第二管,，依次類推，10倍梯度稀釋,，一直到最末一管
（3）于37度培養(yǎng),，以培養(yǎng)基顏色改變的最末一管作為待測菌液的CCU，也就是支原體的最-大代謝活力,，比如第六管出現(xiàn)顏色改變,，他的相對濃度就是10的6次方CCU/ml.
一般來說，比濁法和菌落計數(shù)法就可以滿足絕大多數(shù)細(xì)菌的計數(shù),，但是對支原體這樣比較特殊的微生物,，用CCU法比較合適。
測定微生物生長的方法很多,，各種方法均有其優(yōu)缺點,，也不是在任何情況下都適用。在微生物學(xué)工作中一般常用的是平皿菌落計數(shù)法,、計數(shù)器法和比濁法,。至于哪種方法比較適合你,，得根據(jù)你的具體條件而定。
2,、計數(shù)器測定法：
即用血細(xì)胞計數(shù)器進行計數(shù),。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計數(shù)器的計數(shù)室內(nèi)，用顯微鏡觀察計數(shù),。由于計數(shù)室的容積是一定的(O.1mm3),，因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù)，可計算樣品中的含菌數(shù),。本法簡便易行,，可立即得出結(jié)果。
本法不僅適于細(xì)菌計數(shù),，也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù),。
3、電子計數(shù)器計數(shù)法:
電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,，小孔僅能通過一個細(xì)胞,，當(dāng)一個細(xì)胞通過這個小孔時，電阻明顯增加,，形成一個脈沖,，自動記錄在電子記錄裝置上。
該法測定結(jié)果較準(zhǔn)確,，但它只識別顆粒大小,，而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此,，要求菌懸液中不含任何碎片,。
4、活細(xì)胞計數(shù)法
常用的有平板菌落計數(shù)法,，是根據(jù)每個活的細(xì)菌能長出一個菌落的原理設(shè)計的,。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋,，然后將定量的稀釋液進行平板培養(yǎng),，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)，可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù),。此法靈敏度高,，是一種檢測污染活菌數(shù)的方法，也是目前國際上許多國家所采用的方法,。使用該法應(yīng)注意：①一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù),，過多或過少均不準(zhǔn)確；②為了防止菌落蔓延,，影響計數(shù),，可在培養(yǎng)基中加入O．001％2,，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC),；③本法限用于形成菌落的微生物,。
廣泛應(yīng)用于水、牛奶,、食物,、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗，是最chang用的活菌計數(shù)法,。
5,、比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比,，與光密度成正比,，所以，可用光電比色計測定菌液,，用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度,。
此法簡便快捷，但只能檢測含有大量細(xì)菌的懸浮液,，得出相對的細(xì)菌數(shù)目,，對顏色太深的樣品，不能用此法測定,。
6,、測定細(xì)胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進行稱重,；干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后,，以清水洗凈放人干燥器加熱烘干，使之失去水分然后稱重,。
此法適于菌體濃度較高的樣品,，是測定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
7,、測定細(xì)胞總氮量或總碳量
氮、碳是細(xì)胞的主要成分,，含量較穩(wěn)定,，測定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量,。此法適于細(xì)胞濃度較高的樣品,。