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血清的選購指南
閱讀:362 發(fā)布時間:2021-11-24胎牛血清的選擇,,市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,,很多科研工作者,,特別是剛接觸細胞培養(yǎng)的人,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣,。根據(jù)鄙人十多年來血清銷售的經(jīng)驗來看,。
外觀
拿到血清,zui先接觸的是血清外觀,,對于缺少細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說,,外觀的判斷尤為重要
1、顏色
根據(jù)血紅蛋白含量的不同,,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,,我國的細胞培養(yǎng)用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度,,良好的操作能降低血清的溶血。
國產(chǎn)血清的采血點很分散,,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,,所以很少會有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,,當然,,國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛血清。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,,因為真正的胎牛血清凝血功能差,,紅細胞容易破裂。
總的來說,,國產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃,。進口的血清,質(zhì)量的呈現(xiàn)出談黃,、微紅色,,如Gibco 16000,差點的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色,。當然,,熱滅活血清或保存不當?shù)难澹捎谘t蛋白的破壞氧化,,會呈現(xiàn)出暗紅,,甚至咖啡色。
2,、沉淀
很多血清客戶,,會發(fā)現(xiàn)進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,,這是沒有根據(jù)的,。
血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,,沉淀的產(chǎn)生原因很多,,和的加工方式密切相關(guān)。
國產(chǎn)的血清,,大多來自北方,,由于價格低廉,保存環(huán)境都不好,,從采血,、冷凍、運輸?shù)綍?jīng)過多次凍融,,每次凍融過程,,就會析出部分纖維蛋白沉淀,,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈",,很少有沉淀產(chǎn)生,。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,,后的成品也是清澈的,,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀,。當然,,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,,后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀,。
當然,,購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進行,否則沉淀相對較多,,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3,、澄清度
進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,,表現(xiàn)為稀薄、清淡,,而國產(chǎn)血清,,因為絕大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,,顏色略深,,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,,可容易分辨,。
胎牛血清使用中的常見問題
1、 如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
長時間儲存在2-8℃時,,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原,、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,,并避免反復凍融,。
我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,,請勿超過一個月,。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?nèi),,再放回冷凍,。
2、血清中包含絮狀沉淀,,它們是什么,,怎么處理?
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,,不會影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,離心血清(400g,,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾),。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解,。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,,沉淀會自然消失,。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時,,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,,從而影響血清的品質(zhì)。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無須做此步驟。
(6) 若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。