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大鼠ELISA試劑盒的處理方式
閱讀：127 發(fā)布時(shí)間：2021-4-2大鼠ELISA試劑盒處理方式:
1、胃液,、唾液,、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，胃液,、唾液佳的采集時(shí)間是空腹采集,，一般隔夜尿不采集；
2,、采集血清時(shí),，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時(shí)后,，800-1000rmpx5min分離,，取上清,，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
3、組織提取液,、肺泡灌洗液等,，采集后離心分離，800-1000rmpx5min,，取上清,，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
4、采集血漿時(shí)一般不加抗凝劑,，采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?/p>
5,、不貼壁細(xì)胞(分泌性蛋白),，將培養(yǎng)基和細(xì)胞轉(zhuǎn)移至10ml離心管，500-800rmpx10min,，吸取上清至另一10ml離心管中,，10000rmpx10min，-20℃或4℃保存,，作為標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),，如有需要可進(jìn)行透析或純化處理。
檢測(cè)試劑盒基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性,。在測(cè)定時(shí),，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開,。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,，也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度,。 ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體,。
大鼠ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
1.保用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A,、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
2.按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
3.加入試劑的順序應(yīng)*,，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
4.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
5.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
6.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫,。稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存。
7.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
8.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
9.底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。