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小鼠源細胞操作步驟與注意事項

閱讀:231          發(fā)布時間:2021-2-25

小鼠源細胞操作步驟:

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,,在*,、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*,、第二孔中加標準品稀釋液50μl,,混勻;然后從*孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,,混勻,;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,,再在第五,、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,,混勻;混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,再在第七,、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30后棄去,如此重復5次,,拍干,。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。

7. 溫育:操作同3,。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉黃色),。

小鼠源細胞注意事項: 

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸,。

2,、務必使用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,,不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑,。

3、取完一種試劑后,,應將工具洗凈,、擦干后,方可取用另一種試劑,。

4,、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,,絕不允許張冠李戴,,用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi),。

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