技術(shù)文章
ELISA試劑盒器材分類的幾點(diǎn)
閱讀:178 發(fā)布時(shí)間:2021-1-27ELISA試劑盒原理:
免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開(kāi)優(yōu)質(zhì)的原料,,如抗原抗體,,酶等,。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成方法制備。近年來(lái),,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn),。
ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):
1,、 血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2,、 血漿:EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè),。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3、 細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
4,、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,,取上清液,。
5、 保存:如果樣品不立即使用,,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
器材:
(1) 聚苯乙烯塑料板(簡(jiǎn)稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA檢測(cè)儀,,50μl及100μl加樣器,,塑料滴頭,小毛巾,,洗滌瓶,。
(2) 小燒杯、玻璃棒,、試管,、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,,37℃孵育箱,。