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人ELISA試劑盒原理：

    采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平,。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板，制成固相載體,，實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品,，并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體,，標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合,。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，再用硫酸終止反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成黃色。標(biāo)本中抗體量越多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,，顏色越淺。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負(fù)相關(guān),。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度（OD值）,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算測試樣品中OXLDL濃度,。

人ELISA試劑盒操作程序：

    1. 棄去液體,，甩干，每孔加滿稀釋后洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。如此重復(fù)5次,，拍干。

    2. 每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘,。,。

    3. 取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。

    4.測定：以空白孔調(diào)零，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

    5.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計(jì)算出對應(yīng)的樣品濃度,。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的，其實(shí)際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù),。

人ELISA試劑盒技術(shù)特點(diǎn)：

1準(zhǔn)確可靠，臨床雙盲對照試驗(yàn)＞1000例,，結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對,，結(jié)果*性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA,。

3快速：整個(gè)檢測流程只需3小時(shí),。

4簡便：試劑盒提供預(yù)混好的試劑,，使體系配置操作簡便。

5防污染

6高特異性：雙重特異性組成,，保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對,，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,，在延伸中產(chǎn)生熒光,。