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ELISA試劑盒操作流程與注意事項
閱讀：765 發(fā)布時間：2020-11-25ELISA試劑盒試驗原理：
ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知TFR/CD71濃度的標準品,、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測,。先將TFR/CD71和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,，然后加入底物A、B,，和酶結(jié)合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TFR/CD71的活性濃度呈比例關系,。
ELISA試劑盒注意事項：
1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未
用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值
大于標準品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
ELISA試劑盒操作流程：
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,，各區(qū)實驗服、儀器 ,、耗材應獨立使用,，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭,；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置,。
2. 為避免RNA降解,，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測,；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理,。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. ELISA試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,，并應瞬時離心,。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放,。
6. 為防止熒光干擾,，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記,。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置,；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,，淬滅基因選擇None,。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。