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小鼠ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu)的方法
閱讀：180 發(fā)布時(shí)間：2020-11-4小鼠ELISA試劑盒原理：
采用競爭法測定金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL水平,。用金黃地鼠氧化低密度脂蛋白OXLDL抗原包被微孔板,，制成固相載體，實(shí)驗(yàn)時(shí)依次在微孔板中加入標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品,，并加入HRP標(biāo)記的OXLDL抗體,，標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合。反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,，再用硫酸終止反應(yīng)，轉(zhuǎn)變成黃色,。標(biāo)本中抗體量越多,，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少，顏色越淺,。顏色的深淺和樣品中的OXLDL含量呈負(fù)相關(guān),。采用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,，計(jì)算測試樣品中OXLDL濃度,。
小鼠ELISA試劑盒安全性：
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存,。
5. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
6. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同小鼠ELISA試劑盒批號(hào)的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時(shí),，避免使用帶金屬部分的加樣器,。
8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
9. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10. 底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,，有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
11. 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
12. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
小鼠ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu)：
一、血清：操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱量和肉毒素的試管,。收集血液后，1000*g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離,。
二,、血漿：EDTA、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
三,、細(xì)胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物,。
四、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,，取上清液。
五,、 保存：如果樣品不立即使用,，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。