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ELISA試劑盒原理與結(jié)構(gòu)處理
閱讀:358 發(fā)布時間:2020-10-21ELISA試劑盒原理:
免疫測定技術的基礎在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應,,所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,,如抗原抗體,酶等,。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用得到的,而抗原ELISA試劑盒或抗體的如酶標結(jié)合物則通過各種化學合成方法制備,。近年來,,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn),。
ELISA試劑盒標本的采集:
能夠應用ELISA試劑盒的樣本種類很多,有血清,,血漿,,細胞上清,,細胞裂解液,尿液,,關節(jié)滑液,,腦脊液,肺泡灌洗液,,各種組織的組織勻漿,;采集和處理的方式都不相同。下面就列出了ELISA試劑盒收集的給類樣本的采集,、處理和保存方式,。
ELISA試劑盒處理和保存:
1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,,加入無菌試管中,。
2、 采血后室溫靜置1小時,。
3,、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀,。
4,、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>
5,、 根據(jù)你的實驗需要,,取適量上清夜進行各種ELISA試劑盒。
ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):
一,、血清:操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,,1000*g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心的分離,。
二、血漿:EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
三,、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
四,、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,,取上清液。
五,、 保存:如果樣品ELISA試劑盒不立即使用,,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍,。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。