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大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒技術(shù)參數(shù)
閱讀:341 發(fā)布時間:2020-7-20大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:用純化的抗體包被微孔板,,制成固相載體,,往包被抗該指
標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品,、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,,經(jīng)過*洗
滌后用底物TMB顯色,。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏
色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度,。
產(chǎn)品范圍:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽,、自身抗體 ,血栓與止血,骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒提供實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)
特異性:本試劑盒可同時檢測天然或重組的,,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng),。
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒操作步驟:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1. 當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時,,盡量避免起沫。
2. 為了避免交叉感染,,配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品,、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭,。另外不同試劑請分別使用不同的移液槽,。
3. 每次孵育時,請正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
4. 混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無色,,請避光保存;假如微孔板后,,將由物色變成不同深度的藍(lán)色,。
5. 終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序*;加入終止液后,,孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃,;若孔內(nèi)有綠色,,則表明孔內(nèi)液體未混勻;請充分混合,。