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影響elisa試劑盒檢測(cè)的原因有哪些
閱讀：262 發(fā)布時(shí)間：2020-6-10ELISA試劑盒 即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法,。由于ELISA方法靈敏,，特
異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。
一：標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過氧化酶物
質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素）,，ELISA試劑盒在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使
H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),，即顯藍(lán)色,，產(chǎn)
生假陽性［2］。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用,。標(biāo)本受細(xì)菌污染,。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化
物酶，因此,，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
二：標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本,，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深,、造成假陽性；為克服上述干
擾,，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集,；如不能立即測(cè)定，5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于
4℃,，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存,；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮,，分布不均,，應(yīng)充分
混合后再測(cè)定,，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可強(qiáng)烈振蕩,。塑料試管能吸附抗原物質(zhì),，樣本久置在塑料管內(nèi)
會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管,；并使用非抗凝標(biāo)本,，肝素抗凝血漿會(huì)增加
OD值，EDTA,、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性,。
三：標(biāo)本凝固不全
在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),，ELISA試劑盒常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血
清,，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,，易造
成假陽性結(jié)果,；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。