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技術(shù)文章

你知道原代細(xì)胞是怎樣培育的嗎?

閱讀:146          發(fā)布時間:2020-4-26

 1、安排塊培育法 

    (1)依照前述辦法取材,,將安排剪成或切成1mm3巨細(xì)的小塊,,并參加少許培育基使安排濕潤。 

    (2)將小塊均勻涂布于瓶壁,,每小塊距離0.2 cm~0.5cm,,一般在25mL培育瓶(底面積為17.5cm2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶內(nèi)參加適量培育基蓋好瓶塞,將瓶歪斜放置在37℃溫箱內(nèi)。 

    (3)培育2~4小時,,待小塊貼附后,,將培育瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培育,,動作要輕,嚴(yán)禁搖擺和來回振動,,以防因為激動而使小塊漂起而造成培育失敗,,若安排塊不易貼壁可預(yù)先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等,。

    2.消化培育法 

    該辦法是選用前述的消化渙散法,,將阻礙細(xì)胞成長的細(xì)胞間質(zhì)(包含基質(zhì)、纖維等)去除,,使細(xì)胞渙散形成細(xì)胞懸液,,然后分瓶培育。 

    3.懸浮細(xì)胞培育法

    關(guān)于懸浮成長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和**細(xì)胞無需消化,,可選用低速離心分離,,直接培育,或經(jīng)細(xì)胞分層液分離后接種培育,。 

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