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小鼠Ⅲ型前膠原肽PⅢNP酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集,、處理及保存
閱讀:217 發(fā)布時間:2019-1-30小鼠Ⅲ型前膠原肽PⅢNP酶聯(lián)免疫試劑盒 樣品收集,、處理及保存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,通過反復凍融,,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。