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其它類(lèi)ELISA試劑盒手工測(cè)定的影響因素
閱讀:250 發(fā)布時(shí)間:2018-8-13其它類(lèi)ELISA試劑盒手工測(cè)定的影響因素
法具有靈敏度高,、特異性強(qiáng),、重復(fù)性好的特點(diǎn),,并具有操作簡(jiǎn)便,、無(wú)放射性危害的優(yōu)點(diǎn),因而多年來(lái)廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室中,,但在測(cè)定中常會(huì)出現(xiàn)一些誤差和問(wèn)題,。我們通過(guò)幾年的實(shí)驗(yàn)觀察,認(rèn)為影響結(jié)果的因素有如下方面,。
1 試劑盒
(1)抗原,、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)降低或失活,結(jié)果不易判斷,。再有ELISA法靈敏度高,,對(duì)雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高,實(shí)驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性,。(2)酶結(jié)合物濃度過(guò)高,,也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。
2 試驗(yàn)儀器
(1)加樣器是否經(jīng)過(guò)校正,,酶免測(cè)定血清用血量很少,,如手工加樣器的性能不好,吸取樣品不,,會(huì)使結(jié)果忽高忽低,。
(2)每次洗板前,應(yīng)檢查洗板機(jī)針孔有無(wú)堵塞,。
3 操作
(1)檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用,,試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏,,以免造成試驗(yàn)結(jié)果假性降低。(2)加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部,,以免擦傷包被物使抗體(抗原)脫落而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。(3)洗滌不充分,會(huì)使結(jié)果假性增高,,過(guò)分洗滌呈假陰性,。(4)比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽,,特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí),,底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,,水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高。(5)抗原與抗體反應(yīng)達(dá)到*平衡,,依賴于溫度與時(shí)間,。溫度高于45℃易引起失活及標(biāo)記物脫落,溫度低于4℃,,影響反應(yīng)速度,。總之,,由于實(shí)驗(yàn)的影響因素較多,,在實(shí)際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),,避免和排除各種因素的影響,,使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。
其它類(lèi)ELISA試劑盒大鼠鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱγ(CAMK2γ)ELISA試劑盒 ,,英文名: CAMK2γ ELISA Kit
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大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒 ,,英文名: SFRP2 ELISA Kit
大鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒 ,,英文名: SFRP1 ELISA Kit
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