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豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中的一些不必要的過失
閱讀:352 發(fā)布時(shí)間:2018-6-13豬ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中的一些不必要的過失
1.評(píng)估試劑的實(shí)用性,試劑的穩(wěn)定與否,,對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn),,判定試劑符合要求后方可使用,。
2.操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作,。
3.加樣要準(zhǔn)確,、快速。加樣不準(zhǔn)確,,酶生成物的量不能確定,,直接影響顯色結(jié)果。另外,,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān),,所以加樣應(yīng)慎重。
4.檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器,、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,,對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決,。
5.使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差,。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測尤為重要,。
6.嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過短,,加入終止液反應(yīng)終止后,,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性,。超過顯色要求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽性,,這可能與試劑本身有關(guān),。
7.洗滌*,洗板不*,,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性,。另外,洗滌液要新鮮,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能出現(xiàn)假陽性。
8.嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,,反應(yīng)時(shí)間過長,,酶失活;反應(yīng)時(shí)間過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合,,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,,容易洗掉,都可能造成假陰性,。
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