詳細介紹
細胞名稱 大鼠乳腺癌細胞;CHGF-003培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
大鼠乳腺癌細胞,;CHGF-003培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),,按公式計算出細胞數(shù),。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,,繪制細胞生長曲線
大鼠乳腺癌細胞;CHGF-003培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
大鼠乳腺癌細胞,;CHGF-003培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-NCoR2/FITC 熒光素標記核受體輔助抑制因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-VDCC-L alpha/FITC 熒光素標記L-型電壓依賴型鈣通道α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體 Anti-AMACR/P504S 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Cy5 Cy5標記的小鼠抗人IgM 0.1ml
GSDML 英文名稱: GSDML蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ProSAPiP1 含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-VDCC-L alpha/FITC 熒光素標記L-型電壓依賴型鈣通道α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LR/Ob-R(Human Leptin receptor) ELISA KIT 人苗條素受體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Integrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF11/Eg5/TRIP5 驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體(甲狀腺激素受體相互作用蛋白5) 規(guī)格 0.2ml
TB-Ab IgG(Human tuberculosis antibody IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG 96T
PCANAP2 英文名稱: 前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體 0.2ml
phospho-CHEK1(Ser317) 英文名稱: 磷酸化細胞周期檢測點激酶1抗體 0.1ml
Anti-Integrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/FITC FITC標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GATAD1 英文名稱: 眼發(fā)育相關(guān)基因蛋白ODAG抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Anterior Gradient 2 前梯度同源蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-21R/FITC 熒光素標記白介素21受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-human IgM whole serum 兔抗人IgM抗血清 規(guī)格 1ml
Anti-Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC 熒光素標記磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠乳腺癌細胞,;CHGF-003培養(yǎng)Anti-PGRN /FITC 熒光素標記顆粒蛋白前體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-rabbit IgM/Gold 金標記小鼠抗兔IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白 Anti-FADD 0.1ml
Donkey Anti-Goat IgG/FITC FITC標記的驢抗羊IgG 0.3ml
Factor VIIIa light chain 英文名稱: 凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原輕鏈抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-SYT1(Thr202) 磷酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgM/Gold 金標記小鼠抗兔IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml