詳細(xì)介紹
小鼠腎小球系膜細(xì)胞;SV40MES13價格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱 小鼠腎小球系膜細(xì)胞,;SV40MES13價格
形態(tài)特性 心肌成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 這株細(xì)胞的細(xì)胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,,在細(xì)胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。 有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,,它們會收縮,。 細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性,。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,5%,;14mM HEPES
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2,。3天內(nèi)可長滿,。
傳代情況 P(27+5)
凍
小鼠腎小球系膜細(xì)胞;SV40MES13價格貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
小鼠腎小球系膜細(xì)胞;SV40MES13價格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮、分散,,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化,、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值,。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Plexin B1/Semaphorin receptor/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)叢蛋白B1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
標(biāo)準(zhǔn)胎血清Multi-class antibodies規(guī)格: 200ml
人類狀瘤病毒抗體 Anti-HPV 0.1ml
Goat anti-Rabbit IgG whole serum 羊抗兔IgG抗血清 1ml
Fibronectin 英文名稱: 纖維連接蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-RCC1 (Ser11) 磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
標(biāo)準(zhǔn)胎血清Multi-class antibodies規(guī)格: 200ml
PR3Ab(Human Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IL-2 白細(xì)胞介素-2單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LRP/MVP 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉 96T
phospho-c-Raf(Ser301) 英文名稱: 磷酸化原癌基因c-Raf抗體 0.1ml
C15orf52 英文名稱: 15號染色體開放閱讀框52抗體 0.2ml
Anti-IL-2 白細(xì)胞介素-2單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素 96T
phospho-PAK1 (Ser) 英文名稱: 磷酸化p21激活激酶1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介素6抗體 規(guī)格 0.1ml
KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽釋放酶10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
CD44v7 英文名稱: CD44V7抗體 0.1ml
Anti-NCOA2/KAT13C 核受體輔助激活蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠腎小球系膜細(xì)胞,;SV40MES13價格C/EBP Alpha(Human CCAAT/enhancer binding protein alpha) ELISA Kit 人CCAAT增強子結(jié)合蛋白αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PDK1/PDPK1 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HLA DMβ 組織相容性復(fù)合體β抗體 規(guī)格 0.1ml
BGP/Gehrelin ELISA Kit 大鼠腦腸肽 96T
Phospho-PRKACB(Thr198) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶C亞性抗體 0.1ml
CtIP 英文名稱: 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白8抗體 0.2ml
Anti-PDK1/PDPK1 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml