詳細(xì)介紹
小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8a5價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;c7b8a5價(jià)格
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 半貼壁生長
特征特性 可產(chǎn)生單克隆抗體。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;c7b8a5價(jià)格貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;c7b8a5價(jià)格操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104,。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-HAVCR1/KIM1/TIM1/FITC 熒光素標(biāo)記甲型肝炎病毒細(xì)胞受體1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Tubb3/FITC 熒光素標(biāo)記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh 5-HTR2B 5-羥色胺受體2B抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
GRAF1 英文名稱: Rho GTP酶激活蛋白26抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh PTK9/TWF1 蛋白酪氨酸激酶9抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Tubb3/FITC 熒光素標(biāo)記β微管蛋白-Ⅲ抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MAG Ab(Human anti-myelin associated glycoprotein antibody) ELISA Kit 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-IKK beta KB抑制蛋白激酶β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGED1 黑色素瘤相關(guān)抗原D1抗體 規(guī)格 0.2ml
OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
RCCD1 英文名稱: RCCD1蛋白抗體 0.1ml
CXCR4 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體 0.1ml
Anti-IKK beta KB抑制蛋白激酶β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP3 英文名稱: GTP酶IMAP家族成員3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-17C/FITC 熒光素標(biāo)記白介素-17C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.3ml
Anti-RAM-11/FITC 熒光素標(biāo)記抗RAM-11抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠雜交瘤細(xì)胞,;c7b8a5價(jià)格FAK(Human focal adhesion kinase) ELISA Kit 人黏著斑激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-NPY1R 神經(jīng)肽Y1受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IGSF11 大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體 規(guī)格 0.2ml
DNP-Ab(Human deoxyribonucleic protein antibody) ELISA Kit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體 96T
PON1 英文名稱: 芳香酯酶1(對(duì)氧磷酶)抗體 0.1ml
CCR8 英文名稱: 細(xì)胞表面趨化因子受體8抗體 0.1ml
Anti-NPY1R 神經(jīng)肽Y1受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml