詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞來源于一興國鯉魚的尾鰭組織,。1983年由*昆明細(xì)胞庫建立,。培養(yǎng)溫度26-28℃。
培養(yǎng)條件 M-199:
with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:
2傳代,;7-10天一次
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
興國鯉尾鰭細(xì)胞,;XGL培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次),。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),,晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,,使細(xì)胞基本成單個懸浮,,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn),。
興國鯉尾鰭細(xì)胞,;XGL培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61),。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,,細(xì)胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁,、懸浮,、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,,獲得細(xì)胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,,吸管分裝混合液,,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征,。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),,按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-GAI3/FITC 熒光素標(biāo)記抑制型G蛋白α3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-NPM (Thr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核仁磷酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Brain protein CG6 腦蛋白CG6抗體 規(guī)格 0.2ml
Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗原 0.5mg
HEBP1 英文名稱: 血紅素結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RFESD RFESD蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Phospho-NPM (Thr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核仁磷酸蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IL-8 小鼠白介素-8Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh MT-ND6 NADH復(fù)合體6抗體 規(guī)格 0.1ml
C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit 人補(bǔ)體1q 96T
SCN7A 英文名稱: 鈉離子通道蛋白7α/Na+ CP type VIIα抗體 0.1ml
C3orf18 英文名稱: 3號染色體開放閱讀框18抗體 0.2ml
Anti-ERAB 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
GLS1 英文名稱: 谷酰胺酶1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體 規(guī)格 1ml
Anti-KIF17/FITC 熒光素標(biāo)記驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 規(guī)格 2ml
Anti-SLC4A4/FITC 熒光素標(biāo)記碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
興國鯉尾鰭細(xì)胞,;XGL培養(yǎng)ALCAM 小鼠白細(xì)胞活化粘附因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ER-Alpha 雌激素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MSH6 錯配修復(fù)蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml
EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb ) ELISA Kit 人抗子宮內(nèi)膜抗體 96T
phospho-STAT5a(Ser726) 英文名稱: 磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 0.1ml
Cox A16 polymerase3D 英文名稱: 柯薩奇病毒A16型聚合酶3D 0.2ml
Anti-ER-Alpha 雌激素受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
興國鯉尾鰭細(xì)胞;XGL培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。