詳細介紹
細胞名稱 小鼠胚胎內層細胞團;R1/E培養(yǎng)
形態(tài)特性 干細胞
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件
傳代方法 特殊培養(yǎng)基
傳代情況11
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
小鼠胚胎內層細胞團,;R1/E培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),,co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃,、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,,用0.25%胰酶消化1~2min,,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮,、分散,,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,,然后加入倍量的培養(yǎng)基,,溫和混勻,吸管分裝混合液,,傳代擴增細胞,。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓,、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液,。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,,按公式計算出細胞數,。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,,取其平均值,,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機取3孔,,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,,繪制細胞生長曲線
小鼠胚胎內層細胞團,;R1/E培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,,以免中和后加入的消化液,,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,,按此比例進行消化,,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,,輕輕吹打,,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗,。
小鼠胚胎內層細胞團,;R1/E培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),,如要高濃度可先離心1000rpm,,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造,。
Anti-SCP2/NLTP/FITC 熒光素標記固醇攜帶蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
多藥耐藥相關蛋白2抗體 Anti-MRP2 0.1ml
5HT4 Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體4抗體 0.1ml
FMDV Polyprotein (VP1 protein) 英文名稱: 口蹄疫病毒A型抗體(N端) 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr579) 磷酸化血小板源性生長因子受體B抗體 規(guī)格 0.1ml
AAT(Alpha-1Anti-tiypsin) α-1抗胰蛋白酶(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 植物維生素D2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Dnmt1/FITC 熒光素標記DNA甲基轉移酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Cyclin B1 周期素B1抗體 規(guī)格 0.1ml
名 價 格(RMB)
Kif14 protein 英文名稱: 驅動蛋白家族Member14蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh WIPF2 WASP結合蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-Dnmt1/FITC 熒光素標記DNA甲基轉移酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SUGT1 英文名稱: SUGT1蛋白抗體 0.2ml
Escherichka coli K88-K99 英文名稱: 豬源產腸毒素性大腸桿菌K88-K99抗體 0.2ml
胚胎干細胞關鍵蛋白抗體 Anti-Nanog 0.1ml
Anti-SGLT1 /FITC 熒光素標記鈉-葡萄糖共轉運載體1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PAK4(Ser474)/PAK5(Ser602)/PAK6(Ser560) 磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體 規(guī)格 0.1ml
Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
小鼠胚胎內層細胞團;R1/E培養(yǎng)Anti-GsaR/FITC 熒光素標記促胃泌素受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Bcr Bcr抗體 規(guī)格 0.2ml
BNP/Biotin 生物素化腦鈉素多肽 0.2ml
Gentamicin(3G7) 英文名稱: 慶大霉素單克隆抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rad51 Rad51抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml