化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,；KM0501培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床,。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞,、耐藥細(xì)胞株,。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿,，光澤度好,，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),。歡迎廣大科研用戶,！
詳細(xì)介紹
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM0501培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞來源于一正常男性的外周血,。2005年由*昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立,。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1：
2傳代；5-6天一次
傳代情況 P7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR Amelogenin：XY,；D8S1179：14,16,；D21S11：30,33.2；D7S820：11,12,；CSF1PO：10,；D3S1358：17；TH01：7,， 9,；D13S317：8，12,；D16S539： 11,，12；D2S1338：,17,20,；D19S433：13,14,；vWA：19,；THOX：8；D18S51：14,15,；D5S818：10,11 ,；FGA：24。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,；KM0501培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413）,，co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化,。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱,，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃,、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng),。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時,，用0.25%胰酶消化1～2min,，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮,、分散,，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液,，然后加入倍量的培養(yǎng)基,，溫和混勻，吸管分裝混合液,，傳代擴(kuò)增細(xì)胞,。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,，待細(xì)胞變圓,、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心,，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液,。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),，按公式計算出細(xì)胞數(shù),。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液,，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,，取其平均值,，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率,。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基,。每天隨機(jī)取3孔,，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,，繪制細(xì)胞生長曲線
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,；KM0501培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好,，以免中和后加入的消化液,，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,，按此比例進(jìn)行消化,，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后,，輕輕吹打,，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,；KM0501培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),，如要高濃度可先離心1000rpm,，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后,，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
Anti-ZW10 peptide/FITC 熒光素標(biāo)記著絲粒蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
膜粘連蛋白 Ⅳ抗體 Anti-Annexin Ⅳ 0.1ml
ZBTB5 英文名稱： 鋅指蛋白ZBTB5抗體 0.2ml
Dact2 英文名稱： Dapper2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗體 規(guī)格 0.1ml
DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結(jié)直腸癌缺失基因抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-ULBP3/N2DL3 UL16結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GCET1 B淋巴細(xì)胞生發(fā)中心相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子配體16 96T
phospho-NFATc2(Ser330) 英文名稱： 磷酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 0.1ml
ADCY10 英文名稱： 腺苷酸環(huán)化酶10抗體 0.2ml
Anti-ULBP3/N2DL3 UL16結(jié)合蛋白3抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
人二氫喋啶還原酶(DHPR)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒，英文名：Col Ⅰ ELISA KiISA Kit for Human Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒,，英文名：gp130 ELISA Kit人粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒,，英文名：PGF2α ELISA KiISA Kit for Human NADPH oxidase 1大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒,，英文名：Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒，英文名：T4 ELISA KiISA Kit for Progesterone大鼠骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒,，英文名：OPG ELISA Kit人增殖細(xì)胞核抗原相關(guān)因子(PCNA-associated factor)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠膽囊收素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒,，英文名：CCK ELISA Kit
人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(ZnT-3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒，英文名：INSL3 ELISA KiISA Kit for Human POU domain, class 5, transcription factor 1大鼠白介素26(IL-26)ELISA試劑盒,，英文名：IL-26 ELISA Kit人血小板衍生生長因子C(PDGF)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒,，英文名：KISS1R ELISA KiISA Kit for Human Regucalcin大鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒，英文名：Activin-A ELISA Kit人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK1(Serine/threonine-protein kinase SIK1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)ELISA試劑盒,，英文名：ADH1 ELISA KiISA Kit for Human Somatostatin receptor type 2大鼠戊糖素(PTD)ELISA試劑盒,，英文名：PTD ELISA Kit人α突觸核蛋白(Alpha-synuclein)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試劑盒，英文名：NKB ELISA Kit
山羊抗大鼠 IgM/HRP 0.1ml 美國Jackson公司分裝
VWF 英文名稱： 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG9A(Ser735) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 規(guī)格 0.1ml
Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Delta Opioid Receptor 英文名稱： D型受體抗體 0.1ml
anti-AQP1 水通道蛋白1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞,；KM0501培養(yǎng)Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補(bǔ)體片斷3aMulti-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-RNF126 環(huán)指蛋白126抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh GstP1/GST class-pi 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶pi基因抗體 規(guī)格 0.1ml
8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8異前列腺素 96T
Oncomodulin 英文名稱： 癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體 0.2ml
Bad 英文名稱： 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體 0.1ml
Anti-RNF126 環(huán)指蛋白126抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml