詳細介紹
PCR基本操作:?
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
武氏盾螨PCR檢測試劑盒進口 | Acarapis woodiPCR | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。特異性強
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術(shù)概論。
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
安普羅銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 121-25-5 Amprolium 進口、國產(chǎn) 200mg
力農(nóng)標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 60719-84-8 Amrinone 進口,、國產(chǎn) 500mg
力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 62749-46-6 Amrinone Related Compound A 進口,、國產(chǎn) 100mg
力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 進口、國產(chǎn) 100mg
力農(nóng)相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: Amrinone Related Compound C 進口,、國產(chǎn) 50mg
阿那曲標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 120511-73-1 Anastrozole 進口,、國產(chǎn) 200mg
穿心蓮內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 5508-58-7 Andrographolide 進口、國產(chǎn) 500mg
穿心蓮提取物標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 90244-84-1 Powdered Andrographis Extract 進口,、國產(chǎn) 500mg
人血管周細胞 (HBVP) ( 5×105 ) 人臍靜脈平滑肌細胞 MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細胞
CM-R044大鼠結(jié)腸平滑肌細胞*培養(yǎng)100mL
SELP Others Human 人 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照)
EL4小鼠淋巴瘤細胞 EL4 mouse lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
白細胞介-17超家族
小鼠胎兒真皮成纖維細胞*培養(yǎng) 100mL
武氏盾螨PCR檢測試劑盒進口