詳細(xì)介紹
PCR基本操作:?
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
衣氏放線菌PCR檢測試劑盒說明書 | Actinomyces israeliiPCR | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞、血液,、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR
衣氏放線菌PCR檢測試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng),。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,。可直接用臨床標(biāo)本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論,。
奧布卡因標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 5987-82-6 Benoxinate Hydrochloride 進(jìn)口,、國產(chǎn) 200mg
醛標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 100-52-7 Benzaldehyde (List Chemical) 進(jìn)口、國產(chǎn) 1ml
扎銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 8001-54-5 進(jìn)口,、國產(chǎn) 5ml
芐索銨標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 121-54-0 Benzethonium Chloride 進(jìn)口,、國產(chǎn) 500mg
佐卡因標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 34584 Benzocaine 進(jìn)口、國產(chǎn) 500mg
標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 65-85-0 Benzoic Acid 進(jìn)口,、國產(chǎn) 300mg
佐那酯標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 104-31-4 Benzonatate 進(jìn)口,、國產(chǎn) 1g
1,4-醌標(biāo)準(zhǔn)品 CAS: 106-51-4 1,4-Benzoquinone 進(jìn)口,、國產(chǎn) 200mg
U14-GFP(小鼠子細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1088[SW-1088; SW1088](人星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
CM-R124大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞*培養(yǎng)100mL
VTCN1 Others Mouse 小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞 Mouse myeloma cell line FO DMEM培養(yǎng)+10%FBS
IL12A & IL12B Protein Mouse 重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白
小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng) 100mL9041-22-9高端化學(xué)試分揀連接蛋白14(SNX14)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
9041-22-9高端化學(xué)試分揀連接蛋白16(SNX16)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
27814-48-8高端化學(xué)試矢車菊苷β6(CENTβ6)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
27814-48-8高端化學(xué)試白介1θ(IL1θ)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
29702-43-0高端化學(xué)試紋蛋白3(STRN3)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
29702-43-0高端化學(xué)試B-黑色瘤原2(BAGE2)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
1109-28-0高端化學(xué)試死亡因子4(MORF4)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
1109-28-0高端化學(xué)試防御β126(DEFβ126)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
10357-27-4高端化學(xué)試鈣黏蛋白26(CDH26)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)
10357-27-4高端化學(xué)試Sideroflexin 5蛋白(SFXN5)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)