詳細介紹
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
桿狀巴爾通體PCR檢測試劑盒說明書 | Bartonella bacilliformisPCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術:引物設計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
桿狀巴爾通體PCR檢測試劑盒說明書用于環(huán)境分析.HPLC≥98%MAX二聚化蛋白1檢測試盒1mlKSHV
用于環(huán)境分析,GC≥99%MAP酶雙特異性酶1檢測試盒250mgKSHV-IgG
用于環(huán)境分析,GC≥99%L選擇檢測試盒250mgKSHV-IgM
用于食品分析,HPLC≥97%L-腎上ELISA試盒100mgEBV
GC≥95%L-脫酶檢測試盒0.5mlCM
T≥98%L-氧化酶檢測試盒20mgTNF
HPLC≥98%Klotho ELISA試盒100mgDNMT3AHPLC≥98%17羥皮質類固檢測試盒5mgTrkB
HPLC≥98%17-α-羥化酶檢測試盒5mgADAMTS4
HPLC≥98%16α羥雌1檢測試盒5mgOPGL
HPLC≥98%15-羥前列脫酶檢測試盒5mgON
HPLC≥98%15-epi-氧脂 A4檢測試盒5mgHAV
HPLC≥98%14-3-3 蛋白 beta/alpha檢測試盒5mgHDV
HPLC≥98%12-脂氧化酶/脂加氧酶檢測試盒5mgHSVI
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵,。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術概論,。