詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中,。
PCR基本操作:?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
斑點叉尾鮰病毒PCR檢測試劑盒 | Channel Catfish Virus(CCV)PCR | PCR檢測試劑盒 |
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的定量分析,、基因表達差異分析、基因分型,。
主要技術:引物設計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術概論,。
高端化學,合成試, 1-Boc-4-烷磺酰氧啶
高端化學,固相合成, 硫鎳銨
高端化學,合成試, 雙水楊酰胺鈷
高端化學,固相合成, 2-氧噻
高端化學,合成試, 1-BOC-5-氧代氮雜環(huán)庚烷-4-酯
高端化學,合成試, 2-(3-)
高端化學,固相合成, 1,4-二-2,3-二
高端化學,合成試, 3,4,5-三噠嗪
高端化學,固相合成, 2,6-吡啶二羧二酯
高端化學,合成試, 1--3,5-二硝-2-吡啶
高端化學,固相合成, 4-胺
高端化學,合成試, 2,4-二-6-胺
高端化學,固相合成, 2-胺
高端化學,合成試, 4--3-
高端化學,合成試, 阿加曲班單水合物
高端化學,合成試, 4--2-磺酰
高端化學,合成試, 己二二酯
高端化學,合成試, 丁香茅酯98%100T6-BA
98%100TBt-Cry1Ac protein
98%100TH+-ATP
98%100TPAL
98%50TNADPH-OX
98%100TNADP-ME
98%50TRCA
斑點叉尾鮰病毒PCR檢測試劑盒原理是由一對引物介導,,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。