詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作:?
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
附紅細胞體屬通用PCR檢測試劑盒說明書 | Eperythrozoon spp.PCR | PCR檢測試劑盒 |
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。
20mg/支Ryanodine Receptor 心肌蘭受體體(肌蘭受體)ELISA Kit for Coagulation Factor IX (F9)
Powdered Bilberry Extract20mg/支GCMA/GCM1 絨膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa體ELISA Kit for Coagulation Factor IX (F9)
Bile Salts20mg/支Desmocollin 1 橋粒糖蛋白1體ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing Protein 1 (vWA1)
Positive Bioreaction20mg/支UACA 葡萄膜自身原Uaca體ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing Protein 1 (vWA1)
Biotin20mg/支IL-6 白介6體ELISA Kit for Von Willebrand Factor A Domain Containing Protein 1 (vWA1)
Biperiden20mg/支Caveolin-2 細胞質(zhì)膜微囊蛋白-2體ELISA Kit for Lipoprotein, a (Lpa)
Biperiden Hydrochloride20mg/支AFP(A2) 胎蛋白單克隆體(包被)ELISA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1)
Bisacodyl20mg/支AFP(A4) 胎蛋白單克隆體(檢測)ELISA Kit for Alpha-Fodrin (SPTAN1)42279英文名稱:phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)CD276體
osteopontin英文名稱:MELK21號染色體開放閱讀框25體
osteopontin英文名稱:MGST122號染色體開放閱讀框36體
Orexin-A英文名稱:MUC13補體組分1q子成分樣蛋白1體
Osterix英文名稱:MEPECD44體
Ovalbumin英文名稱:Mast Cell Tryptase9號染色體開放閱讀框114體
Orexin receptor 1+2英文名稱:MAP4CD8β鏈(CD8-β)體
42278英文名稱:MSS16號染色體開放閱讀框1體
附紅細胞體屬通用PCR檢測試劑盒說明書原理是由一對引物介導,,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。