詳細介紹
原理是由一對引物介導,,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
產(chǎn)氣腸桿菌PCR檢測試劑盒 | Enterobacter aerogenesPCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術:引物設計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR
產(chǎn)氣腸桿菌PCR檢測試劑盒20mg/支GPR124 G蛋白偶受體124體(腫瘤血管內(nèi)皮標記物)ELISA Kit for Cyclin D3 (CCND3)
20mg/支GPR172B G蛋白偶受體172B體ELISA Kit for Cyclin D3 (CCND3)
20mg/支GNAQ/Gα q G蛋白α亞單位蛋白Q體ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)
20mg/支RAP1GDS1 G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1體ELISA Kit for Heat Shock Protein 40 (HSP40)
20mg/支RASGEF1A 鳥呤核苷交換因子rasgef1a體ELISA Kit for Heat Shock Protein 90 (HSP90)
Ampicillin20mg/支RAB4 癌因RAS相關蛋白Rab4A體ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)
Ampicillin Sodium20mg/支NSP1/SH2D3A SH2結構域蛋白3A體ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)
Ampicillin Trihydrate20mg/支STARD8 GTP酶激活因子STARD8體ELISA Kit for Amyloid Beta Peptide 1-40 (Ab1-40)NCOA3英文名稱:MUC159號染色體開放閱讀框75體
Netrin 1英文名稱:MMP-22CD4體
TrkB英文名稱:MAG1血小板糖蛋白GPIb體
Notch3英文名稱:MARVELD1蛋白N4體
Neutrophil Elastase英文名稱:MTCP1化蛋白N4體
Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase英文名稱:MAPK8IP1化周期依賴性激酶6體
NGFRAP1英文名稱:MYL6化原癌因CBL2體
NRH2英文名稱:phospho-MEF2C(Ser59)細胞分裂周期蛋白7體
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結合是關鍵,。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術概論,。