詳細(xì)介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒進(jìn)口 | Erysipelothrix rhusiopathiaePCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞,、血液、細(xì)菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒進(jìn)口Ceftriaxone Sodium20mg/支GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G受體α3體ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16)
Ceftriaxone Sodium E-Isomer20mg/支NCEH/AADACL1 中性膽固酯水解酶1體ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16)
Cefuroxime Sodium20mg/支Rab25 癌因RAS相關(guān)蛋白Rab25體ELISA Kit for Clara Cell Protein 16 (CC16)
Cefuroxime Axetil20mg/支Testis 腫瘤抑制因Testin體ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA)
20mg/支ZNF288/ZBTB20 鋅指蛋白288體ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA)
Cellulose Acetate20mg/支ALOX15/15 Lipoxygenase 1 花生四烯15脂氧合酶1體ELISA Kit for Surfactant Associated Protein A (SPA)
Cellaburate20mg/支ABI3BP ABI因家族成員3結(jié)合蛋白體ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2)
Cellacefate20mg/支MTCBP1/ADI1 膜型質(zhì)金屬蛋白酶胞質(zhì)尾結(jié)合蛋白1體ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2)Phospho-MARCKS (Ser152 + Ser156)英文名稱:KCNN419號染色體開放閱讀框75體
Phospho-MARCKS (Ser162)英文名稱:KLHL23隱花色蛋白1體
Met (c Met)英文名稱:KBTBD10隱花色蛋白2體
phospho-MAP3K9+MAP3K10(Thr312 + Thr266)英文名稱:KBTBD4鈣通道L型α2多肽體
TYRO3英文名稱:KLHL24L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)體
MAP3K9英文名稱:KLHL21L型電壓依賴型鈣通道β4體
MC3 Receptor英文名稱:KLHL25電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H體
Menin英文名稱:Kinesin鈣結(jié)合蛋白1體
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位),;在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論,。