實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織,、細(xì)胞、血液,、細(xì)菌等很多材料,，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況,；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號,；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中,。
PCR基本操作：?

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR,，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對定量）和定性分析,。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析,、基因表達(dá)差異分析、基因分型,。
主要技術(shù)：引物設(shè)計,、RNA提取、cDNA合成,、qPCR
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,；
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加,，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞,；在病毒的檢測中,，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后,，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,，不一定要用同位素,，無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板,。可直接用臨床標(biāo)本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細(xì)胞,、活PCR技術(shù)概論。
Phospho-NMDAR2A (Tyr1325)  化谷受體2A體進(jìn)口/國產(chǎn)CTAGE6  CTAGE6蛋白體

NR2B/NMDAR2B  谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)CTAGE4  皮膚T細(xì)胞淋巴瘤相關(guān)原4體

Phospho-NMDAR2B (Tyr1070)  化谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)FAM40A  FAM家族蛋白40A體

NMDAR2B  谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)FAM120B  組織激活過氧化酶活化增生受體γ蛋白體

Phospho-NMDAR2B (Tyr1252)  化谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)FAM55D  FAM55D蛋白體

Phospho-NMDAR2B (Tyr1336)  化谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)TAAL6  腫瘤相關(guān)蛋白原L6體

Phospho-NMDAR2B (Ser1480)  化谷受體2B體進(jìn)口/國產(chǎn)FAM46C  FAM46C蛋白體42279英文名稱：phospho-MAPK8 ( Thr183 + Tyr185)CD276體

osteopontin英文名稱：MELK21號染色體開放閱讀框25體

osteopontin英文名稱：MGST122號染色體開放閱讀框36體

Orexin-A英文名稱：MUC13補體組分1q子成分樣蛋白1體

Osterix英文名稱：MEPECD44體

Ovalbumin英文名稱：Mast Cell Tryptase9號染色體開放閱讀框114體

Orexin receptor 1+2英文名稱：MAP4CD8β鏈（CD8-β）體

42278英文名稱：MSS16號染色體開放閱讀框1體
似血矛線蟲PCR檢測試劑盒進(jìn)口原理是由一對引物介導(dǎo),，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍,，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則,；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,；
④靶基因的特異性與保守性。