詳細介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒說明書 | Melissococcus plutoniusPCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR
蜂房蜜蜂球菌PCR檢測試劑盒說明書OSM/Oncostatin M 抑瘤M體進口/國產(chǎn)DENND1B DENND1B蛋白體
OSMR/OSMRB 抑瘤M受體體進口/國產(chǎn)DEPTOR/DEPDC6 DEPTOR蛋白體
Osterix 成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子體進口/國產(chǎn)DIAPH1 耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白1體
OXCT1 含氧輔酶A轉(zhuǎn)移酶1體進口/國產(chǎn)TBX1/Brachyury 先心病相關(guān)蛋白TBX1體
Os05g0477200 protein 水稻白葉枯病Os05g0477200蛋白體進口/國產(chǎn)DGCR2 DGCR2蛋白體
Oxytocin R 催產(chǎn)受體(縮宮受體)體進口/國產(chǎn)DHPS 脫氧輔合酶蛋白體
OVA/SerpinB8 雞卵白蛋白/卵清蛋白體進口/國產(chǎn)DHPS1 短鏈脫還原酶1體鄰二二(2-己)酯對照品進口/國產(chǎn)PLEKHM2/SKIP 血小板白細胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M2體進口/國產(chǎn)GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激受體α人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,,48T/96T 進口,、國產(chǎn)癸二二(2-己)酯對照品*PLEKHM3 血小板白細胞C激酶底物同源結(jié)構(gòu)域M3體進口/國產(chǎn)BMP-4 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,48T/96T 進口,、國產(chǎn)癸二二酯對照品*PID1 相互作用結(jié)構(gòu)域蛋白1體進口/國產(chǎn)BMP-2 ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2大鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA Kit,,48T/96T 進口、國產(chǎn)二二酯對照品*beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉樣肽1-40(C端)體進口/國產(chǎn)u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 人高敏三狀原人遲現(xiàn)原(VLA)ELISA Kit,48T/96T 進口,、國產(chǎn)
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。