詳細介紹
原理是由一對引物介導,,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 分類 |
豬鼻支原體PCR檢測試劑盒進口 | Mycoplasma hyorhinisPCR | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術:引物設計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
豬鼻支原體PCR檢測試劑盒進口Chlorpropamide20mg/支MOBK1B/C2orf6 2號染色體開放閱讀框6體ELISA Kit for High Mobility Group Protein 17 (HMG17)
20mg/支MTCP1 成熟T淋巴細胞增蛋白1體ELISA Kit for Caspase Activated DNase (CAD)
Chlorthalidone20mg/支Mimitin MYC誘導線粒體蛋白體ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase (PDI)
Chlorzoxazone20mg/支NANOGP8 干細胞轉(zhuǎn)錄因子NANOGP8體ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)
20mg/支NOL8 核仁蛋白8體ELISA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A)
Cholecalciferol (Vitamin D3)20mg/支NUP88 核孔復合體蛋白88體ELISA Kit for Apoptosis Inducing Factor (AIF)
Delta-4,6-cholestadienol20mg/支OCC1 結(jié)腸癌過度表達蛋白1體ELISA Kit for Dopachrome Tautomerase (DCT)
Cholesteryl Caprylate20mg/支OCIAD2 卵巢癌免疫反應原體ELISA Kit for Peptide YY (PYY)48T/96T進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Ciclopirox Related Compound AHPLC法含量測定
48T/96T進口,、國產(chǎn)英文名稱16:20Ciclopirox Olamine檢查
48T/96T進口,、國產(chǎn)英文名稱16:20Ciclopirox Related Compound BHPLC法含量測定用
48T/96T進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Cilastatin Ammonium Salt含量測定
48T/96T進口,、國產(chǎn)英文名稱16:20Cimetidine含量測定
48T/96T進口,、國產(chǎn)英文名稱16:20Cimetidine HydrochlorideUV法含量測定
Ciprofloxacin48T/96T進口、國產(chǎn)英文名稱16:20Cinoxacin含量測定
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便,、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應,。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術概論。