詳細介紹
大鼠原代腎動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,本產品可保持大鼠原代腎動脈平滑肌細胞最佳的生長狀態(tài),。
本產品中已包含大鼠原代腎動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于大鼠原代腎動脈平滑肌細胞的培養(yǎng),。
產品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃,、避光 |
原代平滑肌細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,,避光,保存2個月,;-20℃,,避光,保存6個月,。
1)復蘇大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基密度,。
2)細胞傳代:如果大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數板計數,。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,,細胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
膜相關環(huán)指蛋白2抗體 | 內臟器官發(fā)育轉位相關蛋白NPH2抗體 |
細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體 | SH2結構域蛋白3A抗體 |
生長停滯特異性蛋白6抗體 | 小鼠骨髓間充質干細胞(EGFP標記) |
再生基因蛋白4抗體 | 流感病毒H3N7血凝素抗體 |
血小板糖蛋白GPIb抗體 | 全細胞色素合成酶抗體 |
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞 Human | NOV Others Human 人 CCN3 / NOV 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
三酸腺苷受體受體P2X2抗體 | CHRF細胞,人巨核細胞白血病 人肺癌細胞系(未分化),Calu-6細胞 5637, 人膀胱癌細胞 |
動力蛋白激活蛋白亞基3抗體 | FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人細胞裂解液 (陽性對照) |
8號染色體開放閱讀框40抗體 | 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H23 |
甘油酸二酯酶酸結構域5抗體 | 人正常細胞;Hs 578Bst |
21號染色體開放閱讀框62抗體 | EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0923 |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | 大鼠原代腎動脈平滑肌細胞專用培養(yǎng)基NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC(人臍靜脈血管內皮細胞) |
PTPN2 Others Mouse 小鼠 PTPN2 / TC-PTP (aa 2-314) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人骨骼肌衛(wèi)星細胞總RNAHSkMSC NA |
人心肌成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | 人牙周膜成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL |
1.使用大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基時應注意無菌操作,,避免污染,。
2.本產品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,,可以直接使用,。
3.為保持本大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產品請于保質期內使用,,超出保質期,必須放棄使用,。
5.本產品只供進一步科研使用,,不可應用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,,可能會有少量絮狀物析出,,不影響大鼠原代腎動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基正常使用,。