詳細(xì)介紹
大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng),。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃,、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,,避光,,保存2個(gè)月;-20℃,,避光,,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過(guò)夜),。第二天換液并 檢查大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3)細(xì)胞凍存:待大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
膜相關(guān)0脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 | 島素生長(zhǎng)因子樣家族成員4抗體 |
細(xì)胞周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體 | 膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體 |
生長(zhǎng)休止特定蛋白7抗體 | AsPC-1人轉(zhuǎn)移腺腺癌細(xì)胞 AsPC-1 human metastatic pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% Hyclone滅活血清 |
早老素蛋白-1抗體 | 酸化組蛋白去乙?;?span>4(Ser246)抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體116抗體 | 醛縮酶2抗體 |
人骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | DMT1 Others Human 人 DNMT2 / DMT1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
0脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 | K562細(xì)胞,慢性髓原白血病 人胚肺二倍體細(xì)胞,HLF-02細(xì)胞 lovo, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
兜甲蛋白抗體 | HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體 | HT-29 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
甘油酯激酶粒體抗體 | 大鼠腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
皮膚相互作用蛋白2抗體 | 小鼠背脊髓元MN-dsc |
LTA Protein Human 重組人 TNF-beta / TNFSF1 / Lymphotoxin alpha 蛋白 | 大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基RD細(xì)胞,,惡性胚胎橫紋肌瘤 人肺癌細(xì)胞系,Tul-1細(xì)胞 原代軟骨細(xì)胞特制基礎(chǔ)無(wú)血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml |
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | 人肺泡上皮細(xì)胞總RNAHPAEpiC NA |
人胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
1.使用大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中,。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,,必須放棄使用,。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,,可能會(huì)有少量絮狀物析出,,不影響大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。