詳細介紹
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
超級細菌PCR檢測試劑盒說明書 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
超級細菌PCR檢測試劑盒說明書 戊糖桿 Lactobacillus pentosus植物桿 Lactobacillus plantarum
N-酰-L- 質(zhì)量98%,BR Ac-Ala-OH
柄金錢(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚 Morchella conica
N-酰-D- 質(zhì)量98%,BR N-Acetyl-D-alanine
5637(人膀胱細胞)QGY-7701, 人肝細胞
N-酰-L-酪 質(zhì)量0.98 N-Acetyl-L-Tyrosine
大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum人小梁網(wǎng)細胞*培養(yǎng)
N-酰-L-谷酰 質(zhì)量>98%,BR N-Acetyl-L-Glutamine
泡盛曲 Aspergillus awamori地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis
橙(生物染色) 質(zhì)量BS Methyl orange
百脈根根瘤 Rhizobium loti大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum
分散橙13 質(zhì)量90%,進口分包 Disperse Orange 13
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細胞)CaES-17(人食管細胞)
性橙74 質(zhì)量>85% Acid Orange 74
正灰綠正青 Eupenicillium euglaucum爪哇根 Rhizopus javanicus
煌橙,藏花橙G 質(zhì)量BS Crocein Orange GKu-80英文名稱:S100A18利尿激1A體
C14orf106英文名稱:Hepatitis C Virus NS4B利尿激受體1B體
KNDC1英文名稱:HNRPC二苷核糖化因子鳥呤核苷交換因子2體
KChIP2英文名稱:hnRNP Rα增強子結(jié)合蛋白1體
Katanin p60 A1英文名稱:HIPK4脊髓小共濟失調(diào)10體
Kazrin英文名稱:HCF2蛋白激酶A錨定蛋白7體
KCTD8英文名稱:HIRA苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體12體
Phospho-KSR1 (Ser392)英文名稱:HAPLN4苷三結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體9體
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活PCR技術(shù)概論。