詳細介紹
PCR基本操作:?
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
輪狀病毒PCR檢測試劑盒說明書 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
輪狀病毒PCR檢測試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便,、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),,一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,,無放射性污染、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。
費氏中華根瘤 Sinorhizobium fredii串珠鐮孢 Fusarium moniliforme
大黃(標準品) 質(zhì)量HPLC≥98%,標準品 Rhein
Myc標簽蛋白裂解液卵巢
大黃-8-O-β-D-葡萄糖苷(標準品) 質(zhì)量HPLC≥98%,,標準品 Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside
草菇 Volvariella bombycina異常漢遜酵母 Hansenula anomala
大麥芽(標準品) 質(zhì)量HPLC≥95%,標準品 Hordenine
門氏屬 Salmonella sp.mEPC, 小鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓
大薊苷 質(zhì)量HPLC≥98%,,標準品 Pectolinarin
小鼠胚胎成纖維細胞豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna
丹參(標準品) 質(zhì)量HPLC≥98%,,標準品 Danshensu
大鼠腎小管平滑肌細胞*培養(yǎng)LLC-WRC 256(大鼠腹水細胞)
丹參 質(zhì)量HPLC>95%,丹參提取 Danshensu
土曲 Aspergillus terreus瑞士桿 Lactobacillus helveticus
丹參鈉(標準品) 質(zhì)量HPLC≥98%,標準品 Sodium Danshensu
環(huán)狀芽胞桿 Bacillus circulans柄鏈格孢=柄格孢 Alternaria longipes
丹參I(標準品) 質(zhì)量HPLC≥98%,標準品 Tanshinone INMDAR2B英文名稱:Lactic acid bacterial protein surface8號染色體開放閱讀框59體
Phospho-Nucleophosmin (Ser4)英文名稱:Layilin化補體成分5受體1體
Phospho-NPM (Thr95)英文名稱:LTA4H補體C6體
Phospho-NPM (Thr199)英文名稱:LXR alpha癌胚原相關(guān)細胞粘附分子7體
IKB beta英文名稱:LAPTM4B化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β體
Phospho-NMDAR2A (Tyr1325)英文名稱:LRRN5化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β體
NPTN英文名稱:Lipophilin B轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPδ體
Neuro D2英文名稱:LDOC1轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBPε體