詳細介紹
PCR基本操作:?
原理是由一對引物介導(dǎo),,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
沙眼衣原體PCR檢測試劑盒說明書 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞,、血液,、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種,、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
沙眼衣原體PCR檢測試劑盒說明書PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術(shù)概論,。
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)LLC-MK2(恒河猴腎細胞)
焦性沒食子(標準品) 質(zhì)量含量測定 Pyrogallol
細黃鏈 Streptomyces microflavus嗜熱脂肪地芽孢桿 Geobacillus stearothermophilus
正十九(標準品) 質(zhì)量內(nèi)標 N-NONADECANE
6T-CEM (人T細胞白血病細胞)小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)
啡酯(標準品) 質(zhì)量含量測定 ETHYL CAFFEATE
香菇 Lentinula edodes白黃側(cè)耳 Pleurotus cornucopiae
正十五(標準品) 質(zhì)量內(nèi)標 N-PENTADECANE
糖化酵母 Saccharomyces diastaticus人軟骨細胞*培養(yǎng)
檸檬無水 質(zhì)量>99%,AR Citric acid
苜蓿中華根瘤戊糖桿 Lactobacillus pentosus
檸檬無水(標準品) 質(zhì)量含量測定 Citric acid
RK1(大鼠腎細胞)膠質(zhì)芽胞桿 Bacillus mucilaginosus
鉀(標準品) 質(zhì)量含量測定 Potassium sulfate
類布氏桿 Lactobacillus parabuchneriHepG2/肝細胞
香荊芥(標準品) 質(zhì)量供含量測定用 5-Isopropyl-2-methylphenol94-26-8化學(xué)試Human Plasminogen, Plg Elisa Kit
94-26-8化學(xué)試Human Plasminogen, Plg Elisa Kit
84-61-7化學(xué)試Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4, CTLA-4 Elisa Kit
84-61-7化學(xué)試Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4, CTLA-4 Elisa Kit
84-61-7化學(xué)試Human lambda immunoglobulin light chain, λ-IgLC Elisa Kit
120-61-6化學(xué)試Human lambda immunoglobulin light chain, λ-IgLC Elisa Kit
106-79-6化學(xué)試Human peptide major histocompatibility complex, pMHC Elisa Kit
111-61-5化學(xué)試Human peptide major histocompatibility complex, pMHC Elisa Kit
111-61-5化學(xué)試Human cutaneous lymphocyte-associated antigen, CLA Elisa Kit
111-61-5化學(xué)試Human cutaneous lymphocyte-associated antigen, CLA Elisa Kit