詳細介紹
原理是由一對引物介導,,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
沙門氏菌和痢疾桿菌PCR聯(lián)合測定試劑盒 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
PCR基本操作:?
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞、血液,、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況,;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種、基因準確的名稱和ID號,;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中,。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法,。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加,。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析,、基因表達差異分析,、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計,、RNA提取,、cDNA合成、qPCR
沙門氏菌和痢疾桿菌PCR聯(lián)合測定試劑盒 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae芽孢桿屬 Bacillus sp.
英(標準品) 質(zhì)量供IR鑒別用 5,5-Diphenylhydantoin
裂鏈 Streptomyces rimosus苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
金剛(標準品) 質(zhì)量供檢查用 Adamantane
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae氈青 Penicillium velutinum
普羅帕 質(zhì)量>98%,BR Propafenone Hydrochloride
ACHN, 人腎細胞細胞Ponceau Stain Reagent/麗春紅染色試
普羅帕(標準品) 質(zhì)量供檢查用 Propafenone Hydrochloride
金子綠僵 Metarhizium anisopliae黑木耳 Auricularia auricula
呫噸(標準品) 質(zhì)量供檢查用 Xanthene-9-carboxylic acid
人肺上皮細胞中國倉鼠卵巢細胞亞株
呫噸(標準品) 質(zhì)量供HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查用 Xanthone
Raji,,人Burkitt's淋巴瘤細胞小鼠腸巨噬細胞*培養(yǎng)
丁香(標準品) 質(zhì)量含量測定 Methyl eugenol
鼠李糖桿 Lactobacillus rhamnosus平菇 Pleurotus ostreatus
香葉(標準品) 質(zhì)量含量測定 Geraniol519-73-3化學試Human membrane IgA, mIgA Elisa Kit
593-49-7化學試Human membrane IgA, mIgA Elisa Kit
593-49-7化學試Human immunoglubin joining chain, Ig-j Elisa Kit
593-49-7化學試Human immunoglubin joining chain, Ig-j Elisa Kit
1609-47-8化學試Human β-subunits of hemoglobin, HB-β Elisa Kit
1609-47-8化學試Human β-subunits of hemoglobin, HB-β Elisa Kit
7612-98-8化學試Human secretory immunoglobulin A, SIgA Elisa Kit
7612-98-8化學試Human secretory immunoglobulin A, SIgA Elisa Kit
35245-26-2化學試Human activated coagulation factor Ⅻ, FⅫa Elisa Kit
35245-26-2化學試Human activated coagulation factor Ⅻ, FⅫa Elisa Kit
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,,結(jié)合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應(yīng)液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng),。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。