詳細介紹
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織,、細胞,、血液、細菌等很多材料,,不同的樣本有不同要求,,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息,、物種,、基因準確的名稱和ID號;產(chǎn)品僅用于科研
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。
4)樣本保存于液氮或干冰,,也可以保存于Trizol液中。
PCR基本操作:?
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸檢測試劑盒說明書 | 48T/盒 | 熒光-PCR法 |
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA,、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析,。
主要服務:DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析,、基因分型,。
主要技術:引物設計、RNA提取,、cDNA合成,、qPCR
PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則,;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;產(chǎn)品僅用于科研
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵,。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位),;在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應,。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,,無放射性污染,、易推廣。產(chǎn)品僅用于科研
(4) 對標本的純度要求低
產(chǎn)品僅用于科研不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板,??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液,、洗嗽液,、毛發(fā)、細胞,、活PCR技術概論,。
GBAS英文名稱:phospho-FOXL2 (Ser263)大鼠角化細胞生長因子(KGF)免疫試盒
GBGT1英文名稱:FOXN2大鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)免疫試盒
GBP1英文名稱:phospho-FOXO1A (Ser322 + Ser325)大鼠膠質細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試盒
GBP4英文名稱:Phospho-FoxO1 (Ser329)大鼠膠原吡啶交(PYD)免疫試盒
GBP6英文名稱:FKBP6大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試盒
GCAP1英文名稱:TMA16大鼠降鈣原(PCT)免疫試盒
GCAP2英文名稱:FLNB大鼠降鈣因相關肽(CGRP)免疫試盒
GCAP3英文名稱:FLNC大鼠降鈣(CT)免疫試盒BR,27U/mgAR1gIPL
BR,,27U/mgAR25mgCODP
USP級AR,99% metals basis10gFADE
USP級AR,99% metals basis1gMET-1
USP級AR,99% metals basis25gPAP
USP級98%5gPHBH
3400~20100,,液體,5條帶98%160ulHAS
錦鯉皰疹病毒(KHV)核酸檢測試劑盒說明書原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能,。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合,;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;
④靶基因的特異性與保守性,。